干细胞冻干粉做法大全

发布时间：2023-10-07 分类：干细胞治疗的适用病症

　　

干细胞冻干粉做法大全

　　干细胞可通过冻干技术制成干细胞冻干粉，以便于长期保存和运输。下面是一些干细胞冻干粉的制备方法：

　　

1. 诱导多能干细胞（iPSCs）冻干粉

　　

　　

1. 收集培养好的iPSCs。

　　

2. 将细胞悬浮在PBS缓冲液中。

　　

3. 将细胞离心沉淀。

　　

4. 从PBS缓冲液中移除上清液，用一定比例的DMSO稀释细胞。

　　

5. 在-80℃冷冻保存12小时。

　　

6. 进行干燥、包装、密封。

　　

　　

2. 间充质干细胞（MSCs）冻干粉

　　

　　

1. 去除孵化皿上的培养液，并用PBS缓冲液洗涤3次。

　　

2. 用1%胰蛋白酶（trypsin）消化细胞，加入等体积的DMEM培养基，轻轻振动使其分散。

　　

3. 将细胞数目和浓度进行计数，将细胞加入10% DMSO和90% FBS的混合液中。

　　

4. 在-80℃将混合液冻干，然后进行干燥、包装、密封。

　　

　　

3. 脂肪干细胞（ADSCs）冻干粉

　　

　　

1. 进行细胞培养至达到对数生长期。

　　

2. 去除孵化皿上的培养液，并以PBS缓冲液洗涤细胞2次。

　　

3. 加入等体积的高麦芽糖冻干粉至细胞中，缓慢振荡使其充分混合。

　　

4. 在-80℃速冻保存12小时。

　　

5. 进行干燥、包装、密封。

　　

　　

4. 血管内皮干细胞（EPCs）冻干粉

　　

　　

1. 将EPCs培养至70%-80%的密度。

　　

2. 从培养瓶中移除培养液，洗涤细胞1-2次。

　　

3. 将2ml培养液和2ml 20%甘露醇混合后加入细胞中。

　　

4. 离心15分钟，移除上清液。

　　

5. 将细胞混合液在-80℃速冻保存，然后进行干燥、包装、密封。

　　

　　通过这些方法，可以制备不同种类的干细胞冻干粉以便于长期保存和运输。在操作过程中，需严格控制培养条件和消毒过程，确保细胞质量和安全性。